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Bucculite™ XdU Cell Proliferation Kit 細胞增生檢測試劑組 (螢光顯微鏡或流式細胞儀)

檢測細胞增生是評估細胞存活率、細胞週期和遺傳毒性最可靠的方法之一,其中一個重要方法是在細胞生長的 S 期,在胸腺嘧啶 (thymidine) 存在下測量 DNA 的合成。 Bucculite™ XdU Cell Proliferation Kit 使用 XdU,在 DNA 合成過程中會併入細胞 DNA 中。固定細胞後,以 iFluor® MTA 來標記併入的 XdU,最後以相對應的濾光片組對細胞中形成的 iFluor® 標記 DNA 進行影像觀察或以流式細胞儀分析。 Bucculite™ XdU Cell Proliferation Kit 提供了一種替代抗 BrdU 抗體和 EdU 的點擊化學檢測法,靈敏度高,可用於細胞層級測量活性 DNA 的合成。

商品詳細介紹Product Introduction

測定新合成的 DNA 是偵測增殖細胞最可靠、最精確的方法。其中傳統的方法是於細胞週期的 S 期將胸腺嘧啶類似物 (thymidine analog) - BrdU (Bromo-deoxyuridine) 併入新複製的 DNA 中,後續可使用螢光標記的抗 BrdU 抗體來偵測 BrdU 標記的增殖細胞,但 BrdU 法的步驟繁多,需要使用BrdU抗體,影響因素較多且穩定性比較差。

與 BrdU 檢測不同,Bucculite™ XdU Cell Proliferation Kit 不需使用抗體來定量新合成的 DNA,也不需 DNA 變性來促進 BrdU 標記的核苷酸的抗體檢測。AAT Bioquest 利用點擊化學反應,以獨有含炔烴的胸腺嘧啶類似物 (alkyne-containing thymidine analogs) - XdU 混合物,在 S 期會被併入到新合成的 DNA 中。隨後,透過銅來催化疊氮化物-炔烴的環加成反應 (azide-alkyne cycloadditio),也就是點擊反應,將各種含有吡啶甲基疊氮化物 (picolyl azide) 基團的螢光分子 (例如 iFluor® 488 azide) 與XdU 混合物連結在一起,來檢測併入 DNA中的 XdU。
由於此試劑組使用點擊化學反應來偵測增生細胞,因此背景干擾極小且反應條件溫和,能夠保留細胞的形態、抗原結合位及樣品的完整性,後續能夠使用細胞週期染劑、細胞表面標記的抗體或螢光蛋白來進行多重分析。XdU 併入後,其反應及後續洗滌步驟可在 60 分鐘內完成,並可使用影像系統或流式細胞儀對新合成的 DNA 進行定量分析。

訂購資訊

 
偵測方法 品名   螢光顏色   激發 (Ex) 散發 (Em) 偵測通道 貨號 包裝
  螢光顯微鏡   Bucculite™ XdU Cell
ProliferationFluorescence
Imaging Kit
 綠色 (iFluor® 488)    FITC filter set     FITC filter set       FITC filter set     22326     200 Tests  
紅色 (iFluor® 555)   Cy3/TRITC
filter set
Cy3/TRITC
filter set
Cy3/TRITC
filter set
22327 200 Tests
 深紅色 (iFluor® 647)  Cy5 filter set Cy5 filter set Cy5 filter set 22328 200 Tests
流式細胞儀   Bucculite™ Flow Cytometric  
  XdU Cell Proliferation
Assay Kit  
  藍色 (mFluor™ Violet 450)   405 nm 450/40 nm Pacific Blue  22321 200 Tests
綠色 (iFluor® 488) 488 nm 530/30 nm FITC 22323 200 Tests
紅色 (iFluor® 647) 633/640 nm 660/20 nm APC 22325 200 Tests