組織免疫染色 (IHC)
免疫組織化學 (IHC) 是一種基於抗體的技術,可檢測固定組織切片中感興趣的抗原,通常透過呈色法於光學顯微鏡下觀察,亦可利用不同螢光來標定不同蛋白,做多重染色。
IHC 通常使用間接檢測方法,利用二抗攜帶標記 (如酵素、螢光、生物素等等)。 在使用螢光偵測時,螢光染劑結合的抗體可以被特定波長的光激發並發射光;而使用呈色偵測時,抗體與酵素 (如 HRP) 會結合,再與受質 (如 DAB 或 AEC ) 反應後,會在抗原位點上轉化為有色的沉澱。與直接標定的一抗相比,間接偵測可有效鑑別含量低的抗原或稀有之抗原決定位 (epitope)。此外,透過間接偵測法,多個標記的二抗體可以與單一的一抗結合。在某些情況下,可能需要額外的步驟來放大抗原訊號,例如為了檢測低含量之抗原。