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Cell Meter™ TUNEL Apoptosis Assay Kit (晚期)細胞凋亡偵測套組 <檢測染色體DNA斷裂/片斷化>

DNA 片斷化是晚期細胞凋亡的特徵,藉由去氧核苷酸轉移酶介導的 dUTP 缺口末端標記 (Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labeling, TUNEL) 技術來檢測。AAT 提供兩種 TUNEL Assay Kits,適用於直接活細胞染色或固定過後的細胞或組織切片。

商品詳細介紹Product Introduction

TUNEL assay 的全名為 Terminal deoxynucleotidyl transferase (TdT) dUTP nick end labeling assay,原理是利用末端去氧核苷酸轉移酶TdT (Terminal deoxynucleotidyl transferase) 在凋亡細胞中,將帶有螢光標記的 dUTP 分子附加在 DNA 斷裂末端的 3'-OH 末端上。 這些標記可以通過螢光顯微鏡或流式細胞儀觀察,從而檢測和定位凋亡細胞。

目前 TUNEL 的檢測方法都含有劇毒的二甲胂酸鈉 (sodium cacodylate),而這種物質可能會誘導細胞凋亡,並減少 DNA 的生成及 DNA 鏈的斷裂。AAT 的 Cell Meter Live Cell TUNEL Apoptosis Assay Kit 使用不含二甲胂酸鈉的專有緩衝液系統,並將獨有的螢光染劑併入細胞凋亡過程中形成的 DNA 片段中。此檢測方法經過優化且操作簡單、快速,無需使用任何抗體即可直接檢測貼附型或懸浮型細胞中的細胞凋亡,可適用於流式細胞儀或螢光顯微鏡檢測。

而 Cell Meter Fixed Cell and Tissue TUNEL Apoptosis Assay Kit 則提供一個可輕鬆檢測由細胞凋亡引起的 DNA 碎片化,此檢測方法為非放射性且經過優化,直接併入螢光標記的核苷酸可減少檢測時的步驟,可用於檢測固定的細胞、福馬林固定及石蠟包埋的組織切片中的細胞凋亡;其中使用紅光標定的試劑組可與 GFP 標記的目標蛋白進行多重分析。請注意透過此檢測法檢測 DNA 片段化需要使用交聯劑 (如 4% paraformaldehyde) 來固定樣品,避免使用含乙醇/酒精的固定劑,因為會阻礙小 DNA 片段的萃取,且需要進行樣品的通透處理 (permeabilization)。這兩個步驟對 TUNEL 檢測非常重要,因為有助於外源性 TdT 的進入。

訂購資訊

 
偵測目標 品名 貨號   螢光顏色   kit內含物 流式細胞儀
(激發雷射波長
散發波長及濾片
偵測通道)
螢光顯微鏡
(偵測濾片)
包裝
活細胞  Cell Meter™ Live Cell
TUNEL Apoptosis Assay Kit
  22844   紅色 100X Tunnelyte™ Red,
Reaction Buffer, 1000X Hoechst
488 nm
660/20 nm filter
PE-Cy5 channel
TRITC filter   50 Tests  
22849 綠色 100X Tunnelyte™ Green,
Reaction Buffer, 1000X Hoechst
488 nm 
530/30 nm filter
FITC channel
FITC filter 50 Tests
 固定之細胞及組織   Cell Meter™ Fixed Cell and Tissue 
TUNEL Apoptosis Assay Kit
22851 綠色 Fluorescein 12-dUTP, TdT enzyme,
CoCl2 solution, TdT Reaction Buffer
488 nm
530/30 nm filter
FITC channel
FITC filter 25 Tests
22853 紅色   Tetramethylrhodamine-dUTP, TdT enzyme, 
CoCl2 solution, TdT Reaction Buffer
488 nm 
575/26 nm filter
PE channel
Cy3 filter set 25 Tests
22855 深紅色 TF5-dUTP, TdT enzyme, CoCl2 solution,
TdT Reaction Buffer
633, 640 nm
660/20 nm filter
APC channel
Cy5 filter set 25 Tests
22857 藍色 DEAC-dUTP, TdT enzyme, CoCl2 solution,
TdT Reaction Buffer
405 nm 
525/50 nm filter
  Pacific Orange channel  
  Violet filter set   25 Tests