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Power Styramide™ Signal Amplification - iFluor® PSA™ Imaging Kit 及 iFluor® Styramid

訊號放大系統是一種用於增強目標分子 (例如抗體或核酸探針) 訊號的技術,用於目標分子含量低或訊號較弱的樣品時尤其有效。

PSA 的原理是利用辣根過氧化物酶 (horseradish peroxidase, HRP) 的酵素活性,該酵素活性可以催化已標定的苯乙烯醯胺 (labeled styramide) 分子沉積在目標分子附近。而 Styramide 分子通常會使用報導的基團 (reporter group) 標定,例如螢光團,在與酵素反應後能產生可檢測的訊號。標定的 Styramide 分子的局部沉積會導致目標分子位置的訊號放大,使其更容易檢測到,目前有多種帶螢光的 Styramide 或試劑組 (含有HRP標定的二抗) 可用於 PSA 應用。

商品詳細介紹Product Introduction

PSA™ 特色
  • 靈敏高:可檢測低含量低的目標蛋白,比一般的 IHC、ICC 和 IF 高 100 倍
  • 螢光強:比 Tyramide 系統 (TSA) 高 10~50 倍
  • 節省抗體:能達到同樣的靈敏度,並同時顯著地減少一抗用量
  • 可進行多重分析:可相容於其他螢光標誌或染色方法
  • 使用容易、快速:PSA™ 的自由基反應性更高,可更快獲得結果
 
                           iFluor® 594 Styramide™                                                               Alexa Fluor® 594 tyramide

上圖為人類肺腺癌陽性組織免疫螢光染色的結果,分別以 PSA™ (左) 及 TSA (右) 擴增法對甲醛固定&石蠟包埋組織 (FFPE) 染色的結果比較。先用 Mouse anti-EpCam 抗體染色,再分別使用 iFluor 594™ PSA™ Imaging Kit (含 Goat Anti-Mouse IgG #45290)進行 PSA™ 法染色,或使用 Alexa Fluor® 594 tyramide 進行 TSA 法染色。最後在相同曝光時間下,使用 TRITC 濾片組偵測拍攝影像。細胞核以 Nuclear Blue™ DCS1 (#17548) 進行對比染色。


優異的偵測靈敏度及螢光強度
  • PSA™ 的靈敏度較高,可增加一抗的稀釋倍率
  • 增加一抗的稀釋倍率可減少非專一性的背景訊號,且可克服固定不當或目標蛋白表現量低而訊號不佳的問題
 
上圖為 HeLa 細胞經過固定、打洞/通透處理後,以不同濃度的 rabbit anti-tubulin 一抗進行標記。一抗建議之稀釋度為 1:500 或 2 µg/ml。隨後,使用 iFluor® 488 PSA™ Imaging Kit (含 Goat Anti-Rabbit IgG)、Alexa Fluor® 488 標定的tyramide 或 Alexa Fluor® 488 標定的goat anti-rabbit IgG 對細胞進行染色。在相同條件下 (使用 FITC 濾片組以相同的曝光時間進行分析) 捕捉不同處理的細胞影像,並測量相對螢光訊號強度,比較不同檢測方法之間的差異。

使用 PSA™ 可進行多重分析 (Multiplexing)
  • 可相容於其他螢光標記或細胞/組織染色技術
  • 可相容於螢光染劑 (如 DAPI、Hoechst)、螢光蛋白 (如GFP、YFP、RFP) 及其他 Styramide™ 試劑
  • 可同時觀察多個目標蛋白
  • 可使用同由同一宿主(物種)所產生的一抗,且訊號之間不會產生顯著的干擾
  • 與 TSA 系統 及 螢光二抗相比,PSA™ 的門檻較低
   
             iFluor® 488 PSA™ Kit                        iFluor® 555 PSA™ Kit                                            DAPI                                                          Merged            

上圖為使用 iFluor® PSA™ Imaging kit 對甲醛固定&石蠟包埋的人類肺腺癌進行連續免疫染色的結果。 以 Rabbit anti-EpCam 抗體及含 Goat anti-rabbit IgG 的 iFluor® 488 PSA™ Imaging Kit (#45205) 進行標記。清洗後,再以 Mouse anti-pan Keratin 抗體及含 Goat anti-mouse IgG 的 iFluor® 555 PSA™ Imaging Kit (# 45270) 標記。最後細胞核以 DAPI (#17507) 標記,於共聚焦顯微鏡下擷取影像。


應用廣泛:除了用於 IHC 外,亦可應用於 ICC, ISH 及 流式細胞儀
  • 免疫細胞化學染色 (Immunocytochemistry, ICC)

 
  • 原位雜交 (In Situ Hybridization, ISH)

 
  • 流式細胞儀 (Flow Cytometry)

使用 iFluor 488 Styramide (PSA™) 擴增的訊號比 Goat anti-rabbit IgG-iFluor® 488 直接染色增加 10 倍,比 Alexa Fluor 488 tyramide 增加 5 倍。

訂購資訊
iFluor®  PSA™ Imaging Kit
 
貨號 品名 內含二抗 Ex/Em 偵測濾片組 包裝
  45250     iFluor® 350 PSA™ Imaging Kit     Goat Anti-Mouse IgG HRP     344/448   DAPI   100 Slides  
45260 iFluor® 488 PSA™ Imaging Kit 491/514 FITC 100 Slides
45270 iFluor® 555 PSA™ Imaging Kit 522/567   Cy3/TRITC   100 Slides
45280 iFluor® 594 PSA™ Imaging Kit 587/603 Cy3/TRITC 100 Slides
45240 iFluor® 647 PSA™ Imaging Kit 654/669 Cy5 100 Slides
45200 iFluor® 350 PSA™ Imaging Kit Goat Anti-Rabbit IgG HRP 344/448 DAPI 100 Slides
45205 iFluor® 488 PSA™ Imaging Kit 491/514 FITC 100 Slides
45220 iFluor® 555 PSA™ Imaging Kit 522/567 Cy3/TRITC 100 Slides
45230 iFluor® 594 PSA™ Imaging Kit 587/603 Cy3/TRITC 100 Slides
45290 iFluor® 647 PSA™ Imaging Kit 654/669 Cy5 100 Slides

iFluor® Styramide
 
貨號 品名 Ex/Em   偵測濾片組   包裝
  45000   iFluor® 350 Styramide   345/450   DAPI   100 Slides  
44908 iFluor® 405 Styramide 403/427 100 Slides
44900 iFluor® 440 Styramide 434/480 100 Slides
45097 iFluor® 450 Tyramide 451/502 FITC 100 Slides
44902 iFluor® 460 Styramide 468/493 100 Slides
45020 iFluor® 488 Styramide 491/514 100 Slides
45022 iFluor® 514 Styramide 511/527 100 Slides
45023 iFluor® 532 Styramide 537/560 Cy3/TRITC 100 Slides
45025 iFluor® 546 Styramide 541/557 100 Slides
45027 iFluor® 555 Styramide 522/567 100 Slides
45030 iFluor® 568 Styramide 568/587 Cy3/TRITC 100 Slides
45031 iFluor® 570 Styramide 557/570 100 Slides
45035 iFluor® 594 Styramide 587/603 100 Slides
44904 iFluor® 610 Styramide 610/628 100 Slides
45040 iFluor® 633 Styramide 640/654 100 Slides
45045 iFluor® 647 Styramide 654/669 100 Slides
44906 iFluor® 660 Styramide 663/678 Cy5 100 Slides
45047 iFluor® 670 Styramide 671/682 100 Slides
45050 iFluor® 680 Styramide 683/700 100 Slides
45055 iFluor® 700 Styramide 690/713 Cy7 100 Slides
45065 iFluor® 750 Styramide 757/779 100 Slides
45070 iFluor® 790 Styramide 787/812 100 Slides
45066 Cy7 Styramide
*Superior Replacement
for Cy7 tyramide* 
756/779 100 Slides
45067 iFluor® 860 Styramide
  *IR Fluorescence Imaging*  
853/878 Cy7
Long Pass
100 Slides