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X-gal (BCIG) (用於藍白篩之受質)

X-gal 是一種分生試劑,通常與 IPTG 一起搭配用於藍白篩選、誘導重組蛋白的表現。X-Gal 是 β-半乳糖苷酶 (beta-galactosidase) 的呈色受質,水解後會產生藍色沉澱;而 IPTG 可誘導細菌中 lac 和 tac 操縱子(operon) 基因的轉錄,特別是水解 β-半乳糖苷酶 (beta-galactosidase (ß-Gal)。

商品詳細介紹Product Introduction

藍白篩是一種篩選技術,可以快速且方便的檢測到重組細菌中含有載體 DNA。將合適的 DNA 片段連接到一個載體 (質體) 上,載體再被轉殖到宿主細胞 (細菌),再將其在有 X-gal 的存在下生長。此時的細菌質體若含有插入此載體的重組 DNA,則會產生白色菌落;反之,若 DNA 沒有插入此質體 ,則菌落即呈藍色。

X-gal 的全名為 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-galactopyranoside,可縮寫成 BCIG。為了篩選含有重組 DNA 的細菌克隆,需要在瓊脂平板 (agar plate) 中 加入呈色受質 X-gal。如果產生了 β-半乳糖苷酶,X-gal 會水解形成 5-bromo-4-chloro-indoxyl,會自發地氧化產生一種叫做 5,5'-dibromo-4,4'-dichloro-indigo 的不溶性藍色色素。因此,由非重組細菌形成的菌落呈現藍色,而重組細菌則呈現白色,一般挑選白色的菌落再進行後續的確認。
 
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  BR500-1G     X-gal   1g

註:因 X-gal 對光相當敏感敏感,故 X-gal 溶液及含有X-gal 的培養基應存放於黑暗避光的環境中。

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