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Tris-EDTA Buffer (10X) 抗原修復液

  • 常用於熱誘導修復抗原之緩衝液
  • 10倍預先混合好之蛋白質電泳緩衝液,稀釋成一倍溶液即可使用

商品詳細介紹Product Introduction

在 IHC 的染色流程中,無論樣品是包埋在石蠟中或冷凍以保留組織形態,都需要對樣品進行固定,固定劑可以交聯 (crosslink) 蛋白質,會掩蓋抗原決定位 (epitope) ,限制抗體與標靶抗原的結合,可能會導致訊號微弱或假陰性染色結果。為了促進抗原表位的可用性並增強免疫原性,需要將抗原修復以恢復組織的抗原性。一般常用的方法有兩種:熱誘導 (Heat-Induced Epitope Retrieval, HIER) 及蛋白水解誘導 (Proteolytic-Induced Epitope Retrieval, PIER)。 

蛋白水解誘導表位修復 (PIER) 是一種酵素抗原修復方法,使用蛋白酶K (proteinase K)、胰蛋白酶 (trypsin) 或胃蛋白酶 (pepsin) 等酵素來揭露出抗原;熱誘導表位修復 (HIER) 則是利用熱量來提高表位的可用性,最佳修復條件取決於組織、固定和抗體的類型,作用的溫度、pH 值和時間是關鍵因素,需要針對每種抗體進行最佳化,以在不造成形態損傷的情況下正確揭開抗原。常用的緩衝液有檸檬酸鈉 (10 mM, pH 6)、EDTA (1 mM, pH 8) 和 Tris-EDTA (pH 9),通常需要另外提供熱量(一般為 95-100 °C) ,一起用於HIER中。

Tris-EDTA Buffer (10X) 成份:
0.1 M Tris base
10 mM EDTA
0.5 % Tween 20
pH 9.0