DAPI 是一種細胞不可滲透的藍色螢光染劑，透過與 dsDNA 中富含 A-T 的區域結合，在螢光顯微鏡和流式細胞儀中對死亡、壞死或固定細胞的細胞核進行染色。於螢光顯微鏡下，DAPI 用紫外光激發。當 DAPI 與雙股 DNA 結合時，其最大吸收波長為 358 nm，最大發射波長為 461 nm。DAPI 的一個缺點是其發射範圍相當廣泛。 DAPI 也可與 RNA 結合，儘管它的螢光不如與 DNA 結合那麼的強，當與 RNA 結合時，其發射波長變為 500 nm 左右。
DAPI 的一些替代品包括 Hoechst 系列染劑。雖然兩者都可與 DNA 結合，但 Hoechst 染色劑往往具有較低的細胞毒性和較大的膜滲透性，因此可用於對活細胞進行染色。 DAPI 對細胞膜的通透性較差，毒性較大，多用於死細胞或固定細胞的染色。
使用濃度：
DAPI 的分子量為 350.25 Dalton。在水中的溶解度為中等 (20 mg/mL)，溶解後會產生澄清的黃色溶液。要製備 DAPI 工作溶液，首先將去離子水 (diH2O) 或 DMF (dimethylformamide) 加到粉末中，為了使內容物完全溶解，可使用超音波震盪處理。之後，使用 PBS 將 DAPI 溶液稀釋至所需濃度，典型的染色使用 0.5 µM - 5 µM 之間的濃度。製備完成後，該溶液在 2 至 6°C 置於暗處保存可穩定數週。如需更長的儲存時間，請保存在 < -15 °C 下。
染色條件：
典型的 DAPI 染色可在 5 至 15 分鐘內完成，取決於所使用的操作流程 (protocol)。在適當的條件下，染色可能穩定數小時至數天，但螢光強度可能會隨著時間而降低。在DAPI 染色後的樣品應清洗，以去除未結合的染劑並減少背景螢光。為了在染色後固定細胞，可以使用聚甲醛 (paraformaldehyde) 或其他固定液。
訂購資訊
| 貨號 |
品名 |
包裝 |
| 17507 |
DAPI, 10 mM aqueous solution |
2 mL |
| 17509 |
DAPI Dilactate* |
25 mg |
| 17510 |
DAPI powder |
10 mg |
| 17511 |
DAPI powder |
100 mg |
| 17513 |
DAPI powder |
25 mg |
註：與 DAPI dihydrochloride相比，DAPI Dilactate 具有較佳之水溶性。